Лизоцим (мурамидаза) - гидролитический фермент, играющий одну из ведущих ролей в естественном неспецифическом иммунитете животных и человека, избирательно расщепляющий полисахариды клеточной оболочки бактерий. Он относится к небольшим по размерам белкам (молекулярная масса около 15 тыс. Да), относительно термостабилен (выдерживает температуру пастеризации) и вырабатывается многими органами и тканями организма человека, животных. Самая большая концентрация лизоцима обнаружена в слезах, слюне, кишечном соке, яичном белке). Лизоцим содержится, в первую очередь, в местах соприкосновения организма животных с окружающей средой – в слизистой оболочке желудочно-кишечного тракта, слезной жидкости, слюне, слизи носоглотки. Кроме того, существуют и растительные источники лизоцима, среди которых особенно выделяют капусту, редиску, репу, хрен и папайю.
Лизоцим открыт Александром Флеменгом в 1922 г., его первичная структура была окончательно установлена к 1963 г. установлена его первичная структура, а в 1965 была сконструирована первая полная модель молекулы лизоцима.
Лизоцимы различного происхождения – полученные из белка куриного яйца, молока, плаценты, сыворотки крови или клеток крови человека и животных, – близки по химическому строению, но обладают некоторыми физико-химическими и антигенными различиями, а также отличаются по биологической активности в отношении как бактериальных клеток, так и клеток организма Выделено и изучено более 50 лизоцимов из разных источников. Все они состоят из одной полипептидной цепи и являются сильно основными белками (рН 10,5-11,0).
Наиболее изучен лизоцим белка куриных яиц (молекулярная масса 14306 Да). Полностью определено его строение, в т.ч. методом рентгеноструктурного анализа установлена третичная структура и выявлена связь между пространственным строением фермента и механизмом его действия. Именно яичный белок на сегодняшний день наиболее часто используют для промышленного производства лизоцима, т.к. он содержит максимальное количество лизоцима, по сравнению с другими источниками.
Основная физиологическая функция лизоцима - разрушение внешней оболочки грамположительных бактерий, так называемого «муреинового мешка». К дополнительным функциям фермента относят противовоспалительную активность, которая развивается как следствие снижения количества патогенных микроорганизмов в очаге воспаления. Кроме того, лизоцим является естественным неспецифическим иммуномодулятором: расщепляя муреиновую стенку бактерий, фермент высвобождает мурамилдипептид – мощный стимулятор иммунитета, который входит в состав пептидогликана клеточной стенки практически всех известных грамположительных и грамотрицательных бактерий.
Лизоцим гидрохлорид 99%
Лизоцим – фермент класса гидролаз, с протеолитической активностью не менее 20000 FIP/mg, в форме гидрохлорида, полученный в результате переработки яичного белка.
По структуре представляет собой глобулярный белок, с молекулярной массой около 14,3 кДа. Первичная структура лизоцима состоит из одной полипептидной цепи, включающей 129 аминокислотных остатка. Вторичная структура – глобула, размером 3,0×3,0×4,5 нм, жесткость структуры которой обеспечена наличием четырех внутрицепочечных дисульфидных мостиков.
Изоэлектрическая точка pI = 11,0
Лизоцим растворим в воде, но не растворим в органических растворителях. Сохраняет свою активность при низких температурах.
Наименование показателя качества |
Спецификация |
НД, метод анализа |
Описание |
Мелкодисперсный порошок от белого до кремового или желтоватого цвета |
Визуально |
Запах |
Характерный |
Органолептически |
Ферментативная активность |
Не менее 20000 FIP/mg |
НД производителя |
Содержание (чистота), % |
Не менее 99% |
НД производителя |
рН |
3.0 – 5.0 |
НД производителя |
Потери в массе при высушивании, % |
Не более 8% |
USP 〈731〉 |
Тяжёлые металлы |
Не более 20 ppm |
USP 〈231〉 |
Лизоцим обладает антибактериальной активностью, оказывает иммуномодулирующее, противовоспалительное, антитоксическое действие, стимулирует процессы регенерации и эритропоэза. Антибактериальные свойства лизоцима обусловлены его способностью разрушать клеточные стенки бактерий путём гидролиза 1,4-бета-связей между остатками N-ацетилмурановой кислоты и N-ацетил-D-глюкозамина, входящего в их состав пептидогликана. Иммуномодулирующее действие, обусловлено способностью к активации систему врожденного и приобретенного иммунитета. В современных исследованиях обнаружено антидисбиотическое действие лизоцима, которое позволиляет отнести лизоцим к числу пребиотиков.
Фармацевтика
В фармации лизоцим применяют для лечения хронических септических состояний и гнойных процессов, при ожогах, отморожениях, конъюнктивитах, эрозиях роговицы, стоматитах и других инфекционных заболеваниях. Препарат не токсичен, не раздражает ткани и может использоваться при плохой переносимости других антибактериальных средств. Лизоцим в форме гидрохлорида входит в состав многих лекарственных препаратов для лечения заболеваний горла и ротовой полости, например: таблетки для рассасывания «Гексализ» (Франция), «Ларипронт» (Германия), «Лисобакт» (Босния и Герцеговина). Успешно используют данный фермент и в современной иммунобиотехнологии при производстве иммунотропных лекарственных средств.
БАД
Лизоцим является важным элементом неспецифического иммунитета, благодаря чему широко используется в качестве сырья для изоготовления БАД к пище и продуктов функционального питания. В ряде стран, питание, обогащенное лизоцимом, применяется для детей всех возрастных групп, особенно в первый год жизни при переводе на искусственное или смешанное вскармливание, а также для взрослых — при дисбактериозе, ряде воспалительных заболеваний органов пищеварительной системы и дыхательных путей. В «Единых санитарно-эпидемиологических и гигиенических требованиях к товарам, подлежащим санитарно-эпидемиологическому надзору» установлен адекватный уровень потребления лизоцима.
Пищевая промышленность
Благодаря своей антибактериальной активности, лизоцим применяется в пищевой промышленности для увеличения срока хранения мясных продуктов. В молочной промышленности лизоцим используется при производстве сыров и молока: в твёрдых и полутвердых сырах лизоцим предотвращает позднее вспучивание; в сыром сосисочном фарше, копчёной рыбе он предотвращает образование токсинов бактериями рода Clostridium; в молоке и молочных продуктах увеличивает срок годности. В виноделии лизоцим используют для контроля молочнокислых бактерий, в качестве альтернативы сернистому ангидриду (SO2).
Косметология
INCI: Lysozyme
В качестве активного ингредиента используется в средствах против акне и угревой сыпи, а также лечебной противомикробной косметике. Также используется в качестве натурального консерванта для косметических средств.
Ветеринария
Лизоцим используют как в качестве кормовой добавки, так и в качестве субстанции для изготовления ветеринарных лекарственных средств. В качестве кормовой добавки лизоцим используют для восполнения дефицита лизоцима в организме скота, птицы и домашних животных. Имеются данные об эффективности перорального применения препаратов лизоцима для терапии маститов у коров.